将母种在无杂菌的区域内转接成原种,原种制好后,当菌丝长到原种瓶一半时,将原种瓶在接种箱或接种室,或在无杂菌的区域内,弃掉封口的棉塞或牛皮纸,用两层塑料薄膜扎紧,使其缺氧。当菌丝生长耗尽瓶内的剩余氧气后,便停止生长或生长极为缓慢,即使菌丝长到瓶底,但因缺氧不能呼吸也就不可能转向生殖生长阶段,这样就可以达到保藏菌丝始终充满生命力而不衰老的目的。不过,在使用之前,一定要将瓶口的封头松动(但不能打开瓶口),让其呼吸一至两天氧气,使菌丝具有旺盛的生命力方可使用。
此方法实用简单,特别适宜刚开始种菇的菇农,以及没有贮藏菌种设备的菇农采用。只要注意无杂菌操作,便会给菇农在制菌种时带来极大的好处。