南开大学生物系 蒋谷人 刘安西 周爱莲
日本国立癌中心研究所对扣担子菌类抑瘤的有效成分作了较全面的报道,但对其抑瘤机理,各家报道不一,作者以津白一号(TAI)纯系小鼠植入白发性肉瘤S79作为肿瘤模型,以研究香菇多糖、口菇多糖的抑瘤机理:
一、材料:
香菇福建产,口菇张家口产,津白1号纯系小鼠、TAI带瘤(S79)小鼠,其余试剂为AR级。
二、方法:
1 担子菌多糖的提取:以热水提取,乙醇分级部分沉淀,鲸蜡基三甲基铵分级沉淀,蜡酸分级部分抽提纯化而得。
2 瘤株移植:剖取皮下肉瘤,迅速称量,以4倍的生理盐水制成细胞悬液,于每只小鼠的腹股沟皮注入0.2ml的细胞悬液(约含6X106个细胞)。成活率100%。
3 腹腔巨噬细胞吞噬功能的测定:于实验鼠和对照鼠的腹腔内各注入0.2ml生理盐水,数分钟后将小鼠眼眶放血致死,抽取腹腔渗出液1ml,入入装有少量肝素的试管内,并滴加鸡红细胞悬液0.1ml,混匀,放入两片盖片,于37℃下孵育30分钟,取出晾干,甲醇固定,姬姆萨瑞氏染色。镜检100个巨噬细胞及其所吞噬的鸡红细胞数,分别求出巨噬细胞吞有鸡红细胞的百分数(即吞噬率)和每人巨噬细胞内的平均鸡红细胞数(即吞噬指数)。
4 脾脏切片和镜检:脾脏固定于Bouin氏液24小时,石蜡切片,厚度5μm,苏木精伊红染色。作组织学观察。
三、结果:
1 担子菌多糖的抑瘤作用与腹腔巨噬细胞吞噬功能的关系:如表9,随着抑瘤率的增加,腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数也相应增高,二者呈正相关。
表9 药物的抑瘤作用与腹腔巨噬细胞的激活
组别 鼠数 剂量
(mg/kg/日) 平均瘤重
(g)
抑瘤率
(%) 吞噬百分率
(%) P值 吞噬指数 P值
对照组 7 2.862±1.593 58.00±12.14 1.248±0.314
香菇多糖 7 12×10 1.61±0.915 43.74 78.50±3.72 <0.01 2.212±0.166 <0.005
口菇多糖 8 12×10 2.515±1.81 12.12 74.00±4.65 <0.01 2.276±0.792 <0.005
2 担子菌多糖的抑瘤作用与脾脏组织增长分化的关系:如表10,随抑瘤率增高,其脾重/体重百分比也相应增高,由脾切片可见,脾中淋巴小结数增多,红髓内巨噬细胞增多,说明脾脏处于迅速地增长和分化状态。这是担子菌多糖增强免疫机能抑瘤的又一证明。
表10 药物的抑作用与脾脏的增长、分化(x±SE)
组别 鼠数 剂量
(mg/kg/日) 平均瘤重
(g)
抑瘤率
(%) 脾重/体重
(%) 脾横切片镜检
淋巴小结数 P值 P值
对照组 7 0.1ml/只X10 2.862±1.593 0.803±0.236 14.80±2.17 153.4±27.9
香菇多糖 7 12×10 1.61±0.915 43.3 1.367±0.378 21.80±5.56 <0.025 183.9±49.78 <0.15
口菇多糖 8 12×10 2.515±1.81 12.2 0.936±0.269 23.00±5.76 <0.01 207.33±45.73 <0.025
四、讨论
由以上实验可见,香菇多糖等抗肿瘤作用,表现了强烈的宿主介导性,不仅促使脾脏的增长和分化,而且有人报道香菇多糖作为协助者T细胞的特异恢复剂和刺激剂,是目前世界上所知道的最强最好的物质之一。