【作者】刘建雨 刘建辉 张丹 徐珍 王瑞娟 杨慧 于海龙 尚晓冬
【机构】上海市农业科学院食用菌研究所 农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室,国家食用菌工程技术研究中心 上海市农业遗传育种重点实验室
摘要:将酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)Cas9序列(SpCas9序列,Addgene#43802)根据金针菇(Flammulina velutipes)的密码子偏好性进行优化,并构建FvCas9双元表达载体,利用农杆菌介导法转化金针菇单核体Dan3,经抗性培养基筛选以及潮霉素和Cas9基因PCR扩增验证,结果显示Cas9基因已经成功转入金针菇菌丝体中,转化率为6.84%。
基金:上海市市级农口系统青年人才成长计划项目[沪农青字(2017)第1-13号]; 上海市市级农口系统青年人才成长计划项目[沪农青字(2017)第1-11号]; 上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(2015)第5-1号]资助;
关键词:金针菇; 农杆菌介导法; CRISPR/Cas9系统; Cas9;