【作者】朱平 杨金玲 朱慧新 程克棣
【机构】中国医学科学院;中国协和医科大学药物研究所;卫生部天然药物生物合成重点实验室;
【摘要】雷丸(OmphalialapidescensSchroct.)经过Tris-HCl缓冲液浸提,硫酸铵分级沉淀,离子交换,卵粘蛋白-Sepharose4B亲和层析以及Sephacryl-S100分子筛等步骤,纯化得到纯度为95%以上的雷扎凝集素(简称OLL)。比活提高45.8倍,活力回收2.5%。雷丸凝集素是单一肽链的蛋白质,分子量为12kDa,等电点为7.5,可被半乳糖抑制。具有热稳定性及酸碱(pH1~12)稳定性。2mmol/L氯化锌可使其比活提高4倍。同兔血相比,与人血进行凝集反应,其比活可提高4倍。进行圆二光谱测定,α-螺旋和β-折叠含量较高。与半乳糖间的抑制反应瞬间内完成,且空间结构变得紧密。
【基金】人事部留学回国人员科技活动基金;中国医学科学院中国协和医科大学青年科技人才基金;国家自然科学基金;
【关键词】赤霉菌; 原生质体; DNA转化; 潮霉素B抗性基因;