【作者】胡乐琴 姚泉洪 陈明杰 熊爱生 潘迎捷
【机构】南京农业大学资环学院;上海农科院生物技术研究中心;上海农科院食用菌研究所;农业部食用菌遗传育种重点开放实验室;上海农科院食用菌研究所农业部食用菌遗传育种重点开放实验室 南京210095 上海201106
【摘要】应用顺式调控元件探测载体G221构建了一个香菇Lentinula edodes基因组文库。G221为大肠杆菌-酿酒酵母穿梭载体,含有一个由酵母Cyc1基因基本启动子控制的lacZ标记基因,能以转录增强活性筛选香菇DNA片段。用这个基因组文库转化酵母菌,获得了一批lacZ阳性转化子。对其中表达较强的阳性转化子进行质粒抽提和双酶切鉴定,筛选到50个香菇顺式调控元件DNA片段。对其中部分片段进行了测序,并对其中一个序列进行了序列分析,鉴别了该序列上的几个与转录相关的特征序列。该研究也探讨了利用酵母表达系统克隆香菇顺式调控元件的可行性。
【基金】上海科技兴农重点攻关项目资金资助;
【关键词】食用菌; 基因组文库; 转录增强活性; LacZ;