【机构】华北制药集团新药研究开发有限责任公司 华北制药集团新药研究开发有限责任公司 石家庄050015
【摘要】本研究以四种不同物种来源,不同代谢途径功能基因的启动子为材料,分别构建了以产黄青霉异青霉素N合成酶(IPNS)基因pcbC的启动子Pipns、构巢曲霉3-磷酸甘油醛脱氢酶基因gpdA的启动子PgpdA、构巢曲霉色氨酸合成基因trpC的启动子PtrpC、粗糙脉胞霉氨基酸合成交叉途径控制基因cpc的启动子Pcpc为启动子,腐草霉素(phleomycin)抗性基因为报告基因,构巢曲霉色氨酸合成基因trpC的终止子TtrpC为终止信号的丝状真菌转基因质粒,建立了产黄青霉工业生产菌种启动子筛选、评价体系,调查了这四种启动子的强弱。结果表明选择性标记基因受强启动子驱动可以提高产黄青霉工业生产菌种的转基因效率。研究也显示这四种启动子的强弱的顺序为PgpdA、Pcpc、Pipns和PtrpC。
【基金】国家高技术研究发展计划(863计划)(2003AA001005)； 国家科技攻关计划(2002BA711A16)； 国家技术创新项目计划资金资助；
【关键词】调控元件; 抗性基因; 转化效率;
载体结构图
产黄青霉菌转化子 PCR 分析 (引物 ph1 和 ph2 扩增结果)